Příprava a charakteristika nanovlákenných scaffoldů založených na PVA a jejich funkcionalizace růstovými faktory

dc.contributorVištejnová Lucie, Ing. Ph.D. : 66145
dc.contributor.advisorJenčová Věra, Ing. Ph.D. : 63504
dc.contributor.authorLisnenko, Maxim
dc.date.accessioned2021-02-04T18:48:25Z
dc.date.available2021-02-04T18:48:25Z
dc.date.committed2020-5-15
dc.date.defense2020-07-01
dc.date.submitted2019-2-20
dc.date.updated2020-7-1
dc.degree.levelIng.
dc.description.abstractZvýšení biologické aktivity nanovlákenných materiálů strukturně připomínajících extracelulární hmotu určuje v současné době potenciální směr vývoje tkáňového inženýrství. Z hlediska podpory hojení a regenerace tkání je slibné použití plasmy bohaté na trombocyty, která obsahuje stovky biologicky aktivních látek schopných podporovat buněčnou adhezi a proliferaci. Předkládaná diplomová práce se zabývá přípravou nanovlákenných materiálů založených na PVA s obsahem nativních trombocytárních růstových faktorů, které jsou časem postupně uvolňovány. V teoretické části je stručně popsána výroba nanovlákenných scaffoldů pomocí střídavého (AC) a stejnosměrného (DC) elektrického zvlákňování, dále jsou krátce charakterizovány trombocytární růstové faktory a existující způsoby funkcionalizace scaffoldů. V experimentální části byl optimalizován postup přípravy materiálů zejména pomocí AC electrospinningu ve velkém měřítku, který neovlivňuje aktivitu inkorporovaných proteinů ve výsledné nanovlákenné vrstvě. Úzká distribuce průměrů vláken (260 ? 85,74 nm) a malý výskyt defektů zajišťují homogenní inkorporaci proteinů. Díky použití PVA s vysokou molekulovou hmotností (125 000 g / mol) a s vysokým stupněm hydrolýzy (98 - 98,8 %) bylo dosaženo snížení rozpustnosti scaffoldů bez nutnosti dodatečného kovalentního síťování. Snížení rozpustnosti PVA způsobuje pozvolné uvolňování proteinů, kdy po počátečním rychlém uvolnění 90 % proteinů, je zbývajících 10 % postupně uvolňováno v průběhu dalších sedmi dnů. Cílem práce bylo také vzájemné porovnání technologií AC a DC electrospinningu z hlediska procesu výroby a morfologie nanovláken, uvolňování proteinů, rozpouštění PVA a krystalinity. Přestože samotné uvolňování proteinů má podobný průběh, v celé řadě dalších sledovaných parametrů se materiály výrazně liší. Kromě toho byla studována možnost dalšího zpomalení uvolňování proteinů a stabilizace PVA materiálů metodou freeze-thaw. Na základě dosažených výsledků je možné předpokládat potenciální použití materiálů funkcionalizovaných nativními proteiny např. v hojení velkých a chronických kožních poranění.cs
dc.description.abstractThe increase in biological activity of nanofibrous materials structurally mimics natural extracellular matrix, it currently determines the potential direction of development of tissue engineering. In terms of promoting tissue healing and regeneration, the use of platelet rich plasma, which contains hundreds of biologically active compounds capable of promoting cell adhesion and proliferation, is promising. The presented master thesis deals with the preparation of nanofibrous materials based on PVA containing native platelet-derived growth factors, which are gradually released. The theoretical part briefly describes the production of nanofiber scaffolds using alternating (AC) and direct (DC) current electrospinning, then shortly characterizes platelet-derived growth factors and existing methods of functionalization of scaffolds. In the experimental part, the large scale preparation of materials by AC electrospinning was optimized. The process does not affect the activity of incorporated proteins in the resulting nanofiber layer. The narrow distribution of fiber diameters (260 ? 85.74 nm) and the low incidence of defects ensure homogeneous protein incorporation. Thanks to the use of PVA with high molecular weight (125,000 g / mol) and with a high degree of hydrolysis (98-98.8 %), a reduction in the solubility of scaffolds was achieved without the need for additional covalent crosslinking. The reduction in the solubility of PVA causes a slow release of proteins, where after an initial rapid release of 90 % of the proteins, the remaining 10 % is gradually released over the next seven days. The aim of the work was also a mutual comparison of AC and DC electrospinning technologies in terms of the production process and morphology of nanofibers, protein release, PVA dissolution and crystallinity. Although the release of proteins itself is a similar process, the materials differ significantly in a number of other monitored parameters. In addition, the possibility of further slowing the release of proteins and stabilizing PVA materials by the freeze-thaw method was studied. Based on the attained results, it is possible to assume the potential use of materials functionalized with native proteins, e.g. in the healing of large and chronic skin wounds.en
dc.description.mark
dc.format83 s.
dc.format.extentIlustrace, Grafy, Tabulky ROM
dc.identifier.signatureV 202102500
dc.identifier.urihttps://dspace.tul.cz/handle/15240/159770
dc.language.isocs
dc.relation.isbasedonpar[1] BURNOUF, T., STRUNK, D., KOH, M.B.C., SCHALLMOSER, K. Human platelet lysate: replacing fetal bovine serum as a gold standard for human cell propagation? Biomaterials, 2016; 76: 371-387. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2015.10.065.par par[2] PORTO, M.D.A., DOS SANTOS, J.P., HACKBART, H., BRUNI, G.P., FONSECA, L.M., DIAS, A.R.G. Immobilization of alfa-amylase in ultrafine polyvinyl alcohol (PVA) fibers via electrospinning and their stability on different substrates. International Journal of Biological Macromolecules, 2019; 126, 834-841. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2018.12.263.par par[3] SUPAPHOL, P., CHUANGCHOTE, S. On the electrospinning of poly(vinyl alcohol) nanofiber mats: A revisit. Journal of Applied Polymer Science, 2008; 108 (2), 969-978. DOI: 10.1002/app.27664.par par[4] NOBLE, J.E., BAILEY M.J.A. Quantitation of protein. In: Burgess R., Deutscher M. (eds) Methods in enzymology. Guide to protein purification, vol 463, 2009; 2nd edn. Academic, New York, pp 73-95. DOI: 10.1016/s0076-6879(09)63008-1.par par[5] SARKAR, A., LUKÁŠ, D. Physical principles of electrospinning. Liberec: Technická univerzita v Liberci, 2009. ISBN 978-80-7372-508-2.par par[6] SOVKOVÁ, V. Příprava, charakterizace a testování krevních derivátů pro aplikace v regenerativní medicíně. Praha, 2019. Disertační práce. Ústav biofyziky. 2. lékařská fakulta. Školitel RNDr. Evžen Amler, CSc.par
dc.rightsVysokoškolská závěrečná práce je autorské dílo chráněné dle zákona č. 121/2000 Sb., autorský zákon, ve znění pozdějších předpisů. Je možné pořizovat z něj na své náklady a pro svoji osobní potřebu výpisy, opisy a rozmnoženiny. Jeho využití musí být v souladu s autorským zákonem https://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf a citační etikou https://knihovna.tul.cz/document/26cs
dc.rightsA university thesis is a work protected by the Copyright Act. Extracts, copies and transcripts of the thesis are allowed for personal use only and at one?s own expense. The use of thesis should be in compliance with the Copyright Act. https://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf and the citation ethics https://knihovna.tul.cz/document/26en
dc.rights.urihttps://knihovna.tul.cz/document/26
dc.rights.urihttps://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf
dc.subjectnanovláknacs
dc.subjectPVAcs
dc.subjecttrombocytycs
dc.subjectrůstové faktorycs
dc.subjectcílené dodávání léčivcs
dc.subjectnanofibersen
dc.subjectPVAen
dc.subjectplateletsen
dc.subjectgrowth factorsen
dc.subjectdrug delivery systemen
dc.titlePříprava a charakteristika nanovlákenných scaffoldů založených na PVA a jejich funkcionalizace růstovými faktorycs
dc.titlePreparation and characterization of nanofibrous scaffolds based on PVA and their functionalization by growth factorsen
dc.typediplomová prácecs
local.degree.abbreviationNavazující
local.degree.disciplineNNM
local.degree.programmeTextilní inženýrství
local.degree.programmeabbreviationN3106
local.department.abbreviationKNT
local.facultyFakulta textilnícs
local.faculty.abbreviationFT
local.identifier.authorT18000293
local.identifier.stag40856
local.identifier.verbis
local.identifier.verbiskpw06
local.note.administratorsautomat
local.note.secrecyPovoleno ZverejnitPraci Povoleno ZverejnitPosudky
local.poradovecislo2500
Files
Original bundle
Now showing 1 - 4 of 4
Loading...
Thumbnail Image
Name:
Lisnenko_Maxim_DP_2020.pdf
Size:
5.26 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
VSKP
Loading...
Thumbnail Image
Name:
Lisnenko_oponent_Vistejnova.pdf
Size:
809.76 KB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Posudek_oponenta_VSKP
Loading...
Thumbnail Image
Name:
Lisnenko_vedouci_Jencova.pdf
Size:
629.07 KB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Posudek_vedouciho_VSKP
Loading...
Thumbnail Image
Name:
ProtokolSPrubehemObhajobySTAG.pdf
Size:
17.3 KB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Prubeh_obhajoby_VSKP