Antibakteriální nanovlákenné vrstvy pro prevenci infekcí z důvodu kolorektálního leaku

dc.contributorRotková Jana, Mgr. Ph.D. : 58464
dc.contributor.advisorKlíčová Markéta, Ing. : 66913
dc.contributor.authorManhartová, Kristýna
dc.date.accessioned2022-12-19T04:46:52Z
dc.date.available2022-12-19T04:46:52Z
dc.date.committed2022-5-16
dc.date.defense2022-06-15
dc.date.issued2022-06-15
dc.date.submitted2020-11-1
dc.date.updated2022-12-6
dc.degree.levelIng.
dc.description.abstractZa účelem prevence infekcí z důvodu kolorektálního leaku byl vyvinut a následně také otestován nanovlákenný materiál, do něhož bylo inkorporováno antibiotikum Vankomycin hydrochlorid (VCH) o hmotnostních koncentracích 0%; 0,5%; 1% a 1,5%. Antibiotikum bylo inkorporováno do roztoku poly--kaprolaktonu (PCL) a roztok byl následně zvlákněn na bezjehlovém elektrostatickém zařízení NanospiderTM. Morfologie připravených vrstev byla sledována pomocí skenovací elektronové mikroskopie, ze získaných snímků byly měřeny průměry vláken pro ověření homogenity. Smáčivost vlákenných vrstev byla hodnocena pomocí kontaktního úhlu, byla sledována interakce s destilovanou vodou a simulovanou střevní tekutinou, která byla zvolena vzhledem k finální aplikaci. Obsah antibiotik byl otestován pomocí elementární analýzy a vysoce-účinné kapalinové chromatografie (HPLC). Dále byly provedeny testy antibakteriální, jež potvrdily přítomnost, uvolňování a také účinnost antibiotika Vankomycin hydrochlorid v nanovlákenných materiálech. Pomocí testování in vitro, při kterém byly materiály osazeny buněčnou myší linií 3T3 myších fibroblastů, byla hodnocena cytotoxicita extraktů materiálů i samotného antibiotika VCH v médiu. Materiály byly vyhodnoceny jako cytokompatibilní a byla nalezena hraniční toxická koncentrace VCH v médiu. Pomocí testování in vitro byla také ověřena buněčná adheze a proliferace po osazení na materiál. Toho bylo dosaženo za použití metabolického CCK-8 testu, fluorescenční mikroskopie (morfologie buněk a jejich počet), a skenovací elektronové mikroskopie. Test byl vyhodnocován 4.; 7.; 14. a 21. den. Po celou dobu trvání experimentu bylo také pozorováno, jaký má na vyrobené nanovlákenné materiály vliv sterilizace ethylenoxidem, která je vybranou sterilizační metodou před aplikací materiálu in vivo. Žádné významné změny pozorovány nebyly.cs
dc.description.abstractIn order to prevent colorectal leak infections, a nanofibrous material was developed and subsequently tested, into which the antibiotic Vancomycin hydrochloride (VCH) by weight was incorporated at 0%; 0,5%; 1% and 1,5% concentration. The antibiotic was incorporated into the poly--caprolactone (PCL) solution and the solution was subsequently spun on a NanospiderTM needleless electrostatic device. The morphology of the prepared layers was monitored by scanning electron microscopy, and the fiber diameters were measured from the obtained images to verify homogeneity. The wettability of the fibrous layers was evaluated by means of a contact angle, the interaction with distilled water and simulated intestinal fluid was monitored, which was chosen with respect to the final application. The antibiotic content was tested by elemental analysis and high performance liquid chromatography (HPLC). In addition, antibacterial tests were performed to confirm the presence, release and also the effectiveness of the antibiotic Vancomycin hydrochloride in nanofibrous materials. The cytotoxicity of the material extracts and the VCH antibiotic alone in the medium was evaluated by in vitro testing, in which the materials were seeded with the mouse fibroblast 3T3 cell line. The materials were evaluated as cytocompatible and the borderline toxic concentration of VCH in the medium was found. Cell adhesion and proliferation after attachment to the material were also verified by in vitro testing. This was achieved using a metabolic CCK-8 assay, fluorescence microscopy (cell morphology and number), and scanning electron microscopy. The test was evaluated 4th; 7th; 14th and 21st day. Throughout the experiment, the effect of sterilization with ethylene oxide, which is the chosen sterilization method before the application of the material in vivo, was also observed on the produced nanofibrous materials. No significant changes were observed.en
dc.description.mark1
dc.format93
dc.format.extentIlustrace, Grafy, Tabulky 37 obrázků, 24 tabulek.
dc.identifier.signatureV 202204531
dc.identifier.urihttps://dspace.tul.cz/handle/15240/166768
dc.language.isocs
dc.relation.isbasedonpar[1] BACAKOVA Lucie, Elena FILOVA, Martin PARIZEK, Tomas RUML a Vaclav SVORCIK, 2011. Modulation of cell adhesion, proliferation and differentiation on materials designed for body implants. Biotechnology Advances [online]. 29(6), 739767. ISSN 1873-1899. Dostupné z: doi:10.1016/j.biotechadv.2011.06.004.par par[2] PISANI, Silvia, Rossella DORATI, Enrica CHIESA, Ida GENTA, Tiziana MODENA, Giovanna BRUNI, Pietro GRISOLI a Bice CONTI, 2019. Release Profile of Gentamicin Sulfate from Polylactide-co-Polycaprolactone Electrospun Nanofiber Matrices. Pharmaceutics [online]. 11(4) [cit. 2021-01-13]. ISSN 1999-4923. Dostupné z: doi:10.3390/pharmaceutics11040161.par par[3] ROSENDORF, Jachym, Jana HORAKOVA, Marketa KLICOVA, Richard PALEK, Lenka CERVENKOVA, Tomas KURAL, Petr HOSEK, Tomas KRIZ, Vaclav TEGL, Vladimira MOULISOVA, Zbynek TONAR, Vladislav TRESKA, David LUKAS a Vaclav LISKA, 2020. Experimental fortification of intestinal anastomoses with nanofibrous materials in a large animal model. Scientific Reports [online]. 10(1), 1textendash12 [vid. 2020-01-30]. ISSN 2045-2322. Dostupné z: doi:10.1038/s41598-020-58113-4.par
dc.rightsVysokoškolská závěrečná práce je autorské dílo chráněné dle zákona č. 121/2000 Sb., autorský zákon, ve znění pozdějších předpisů. Je možné pořizovat z něj na své náklady a pro svoji osobní potřebu výpisy, opisy a rozmnoženiny. Jeho využití musí být v souladu s autorským zákonem https://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf a citační etikou https://knihovna.tul.cz/document/26cs
dc.rightsA university thesis is a work protected by the Copyright Act. Extracts, copies and transcripts of the thesis are allowed for personal use only and at one?s own expense. The use of thesis should be in compliance with the Copyright Act. https://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf and the citation ethics https://knihovna.tul.cz/document/26en
dc.rights.urihttps://knihovna.tul.cz/document/26
dc.rights.urihttps://www.mkcr.cz/assets/autorske-pravo/01-3982006.pdf
dc.subjecttkáňový nosičcs
dc.subjectnanovláknacs
dc.subjectelektrostatické zvlákňovánícs
dc.subjectstřevní anastomózacs
dc.subjectantibiotikacs
dc.subjectscaffolden
dc.subjectnanofibersen
dc.subjectelectrospinningen
dc.subjectintestinal anastomosisen
dc.subjectantibioticsen
dc.titleAntibakteriální nanovlákenné vrstvy pro prevenci infekcí z důvodu kolorektálního leakucs
dc.titleAntibacterial nanofibrous scaffolds for anastomotic leakage preventionen
dc.typediplomová prácecs
local.degree.abbreviationNavazující
local.degree.disciplineNTN
local.degree.programmeTextilní inženýrství
local.degree.programmeabbreviationN0723A270001
local.department.abbreviationKNT
local.facultyFakulta textilnícs
local.faculty.abbreviationFT
local.identifier.authorT20000010
local.identifier.stag44108
local.identifier.verbis
local.identifier.verbis69321c37-e0d5-4a89-8d06-5774a7886cf8
local.note.administratorsautomat
local.note.secrecyPovoleno ZverejnitPraci Povoleno ZverejnitPosudky
local.poradovecislo4531
Files
Original bundle
Now showing 1 - 4 of 4
Loading...
Thumbnail Image
Name:
DP_Kristyna_Manhartova_2022.pdf
Size:
4.76 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
VSKP
Loading...
Thumbnail Image
Name:
Posudek_vedouciho_na_DP_praci_Kristyna_Manhartova.pdf
Size:
244.15 KB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Posudek_vedouciho_VSKP
Loading...
Thumbnail Image
Name:
Posudek_oponenta_na_DP_Kristyna_Manhartova.pdf
Size:
586.51 KB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Posudek_oponenta_VSKP
Loading...
Thumbnail Image
Name:
ProtokolSPrubehemObhajobySTAG.pdf
Size:
32.11 KB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Prubeh_obhajoby_VSKP